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第五節(jié)  NIAS 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

正如前面章節(jié)所述，NIAS可能存在于FCM 中，但必須遵循公認(rèn)的科學(xué)原則進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估一般包括四個(gè)步驟。對(duì)NIAS而言，根據(jù)問題的不同，這些步驟的順序可能不同：

*危害識(shí)別：評(píng)估化學(xué)物對(duì)健康造成的不良影響，如肝損傷。

*危害特征描述：確定化學(xué)物造成毒性效應(yīng)的劑量，預(yù)測(cè)可忽略或杜絕風(fēng)險(xiǎn)的暴露水平。

*暴露評(píng)估：計(jì)算在不同條件下（如在不同消費(fèi)品中使用化學(xué)物或產(chǎn)品）導(dǎo)致的化學(xué)物的每日暴露量。

*風(fēng)險(xiǎn)特征描述：整合上述步驟中的相關(guān)信息，描述暴露人群面臨的風(fēng)險(xiǎn)，即消費(fèi)人群經(jīng)食物、空氣或皮膚暴露于特定污染物時(shí)，是否有可能增加健康風(fēng)險(xiǎn)？風(fēng)險(xiǎn)特征描述還包括對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中假設(shè)和不確定因素的明確描述，以及對(duì)分析結(jié)果的整體可信度。需要注意，即使是劇毒化學(xué)物，如果其暴露水平非常低，那么其風(fēng)險(xiǎn)也可能很低或完全不存在?！皠┝繘Q定毒性”{paracelsus1493-1541首次提出}是毒理學(xué)的一個(gè)基本原則，風(fēng)險(xiǎn)的公式描述如下：

RISK=HAZARDx EXPOSURE 

風(fēng)險(xiǎn)＝危害x暴露

這個(gè)公式表明，在暴露水平足夠低的前提下，暴露于具有毒性閾值的有害物不會(huì)產(chǎn)生安全問題。同樣，毒性非常低的物質(zhì)，即使暴露水平可能很高，也不會(huì)產(chǎn)生健康風(fēng)險(xiǎn)。

圖1展示了ILSI Europe 專家組針對(duì)已知和未知NIAS提出的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估策略。相應(yīng)子章節(jié)對(duì)每個(gè)步驟進(jìn)行了詳細(xì)解釋。體外生物測(cè)試并非強(qiáng)制，但可用于提供額外信息以支持最終的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

NIAS的信息收集

NIAS僅代表全部FCM成分中的一小部分。FCM由以下類型的材料／物質(zhì)組成：

*FCM的基材?；牡姆肿恿客ǔ＿h(yuǎn)高于10000Da，如塑料／橡膠類FCM中的高分子聚合物或紙／紙板類FCM中的纖維素。但不能排除由于諸如水解（例如縮聚物：來自聚碳酸酯的雙酚A) 、氧化［來自馬口鐵的錫（II) ] 等降解反應(yīng)而從基材中釋放的物質(zhì)。

*在歐盟層面被立法監(jiān)管的可用于塑料材料的IAS,包括單體、添加劑（如抗氧化劑、紫外線吸收劑等）以及難以計(jì)數(shù)的聚合物生產(chǎn)助劑（歐盟針對(duì)塑料類FCM的法規(guī)10/2011) (EU,2011);此外，在歐盟層面被監(jiān)管的還有再生纖維素中使用的IAS（歐盟指令2007/42/EC) (EC,2007).但對(duì)于大多數(shù) FCM, 歐盟還沒有進(jìn)行立法，這時(shí)國(guó)家層面的立法或建議可能會(huì)適用。

*可預(yù)測(cè)的 NIAS.這類物質(zhì)可基于以下方面進(jìn)行預(yù)測(cè)：

O所用到的IAS和基材的化學(xué)知識(shí)；

O加工條件；

O使用條件；

O參考文獻(xiàn)資料；

O 經(jīng)驗(yàn)知識(shí)。

例如，回收紙板中的礦物油、印刷類 FCM中紫外光引發(fā)劑降解產(chǎn)物的“粘臟”、抗氧化劑的氧化產(chǎn)物、聚合過程中形成的環(huán)狀寡聚物以及起始物中的雜質(zhì)。

*不可預(yù)測(cè)的NIAS.NIAS的產(chǎn)生無法預(yù)測(cè)。例如 NIAS涉及FCM非常復(fù)雜的化學(xué)過程（例如

涂層、橡膠和黏合劑）、非FCM的物質(zhì)對(duì)FCM的污染（例如在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中由非FCM污染到FCM) 、置于聚內(nèi)烯嬰兒奶瓶中的說明書上印刷油墨成分的污染（Simoneau等，2012) .

對(duì)可預(yù)測(cè)或不可預(yù)測(cè)的NIAS的評(píng)估，不同的實(shí)驗(yàn)室有不同的方法。為了使方法一致，建議按以下步驟進(jìn)行。步驟1和2通常用于證明FCM中IAS的合規(guī)性，步驟3~5聚焦于需要進(jìn)行的NIAS評(píng)估。

步驟1. 樣品的表征。

必須清晰說明FCM的組成（如對(duì)于多層塑料復(fù)合材料：不同層的材質(zhì)鑒別、使用的黏合劑、涂層、印刷油墨）， 同時(shí)考慮遷移阻隔物以及在儲(chǔ)存期間發(fā)生“粘臟”的可能性。起始物和FCM制成品的生產(chǎn)過程也可能影響到基材、IAS和NIAS混合體的化學(xué)性能，包括加工溫度（如等離子體和輻照處理）和工藝以及干燥時(shí)間和溫度。因此，對(duì)FCM進(jìn)行很好的描述對(duì)于確NIAS類別及用于遷移檢測(cè)的分析技術(shù)至關(guān)重要。下述問題可以提供一些幫助，包括：是否為多層材料、是否用到黏合劑、樣品是否經(jīng)過漂白或使用了涂層、樣品是否經(jīng)印刷、是否有可能存在“粘臟”或是否有潛在污染源、預(yù)期使用的時(shí)間／ 溫度條件等。此外，確定哪些法規(guī)適用于所研究的

FCM也很重要。

步驟2. FCM 或起始物中的IAS是什么？

FCM 中存在的 IAS 的信息應(yīng)該在隨附文件（符合性聲明、規(guī)格說明書、材料安全數(shù)據(jù)表等）中提供。為了促進(jìn)信息共享，重要的是加強(qiáng)供應(yīng)商和客戶之間的溝通，并在相關(guān)方之間就需要多少信息來實(shí)現(xiàn)充分的 NIAS風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估達(dá)成一致。

相關(guān)問題包括：這些IAS從FCM中的遷移量是否符合 FCM 物質(zhì)列表（如塑料）中的特定遷移限值？IAS在非監(jiān)管材料如黏合劑中是否存在潛在的健康問題？有什么雜質(zhì)存在？IAS在最終FCM生產(chǎn)中使用的百分比是多少？在生產(chǎn)IAS過程中通常形成哪些已知的副反應(yīng)產(chǎn)物或降解產(chǎn)物？

步驟3. 可預(yù)測(cè)的 NIAS (如由IAS和基材形成的反應(yīng)產(chǎn)物或分解產(chǎn)物）。

相關(guān)問題是：可以從IAS和基材形成哪些反應(yīng)產(chǎn)物和分解產(chǎn)物（可預(yù)測(cè)的 NIAS) ? 加工條件是什么？這應(yīng)該可以進(jìn)行理論上的評(píng)估，并通過對(duì)遷移物或提取物的篩查分析進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

通過成分信息識(shí)別可預(yù)測(cè)的 NIAS.

可以通過有效的信息交換來識(shí)別存在于FCM 中的可預(yù)測(cè)的 NIAS.可以通過對(duì)已知物的靶向分析來檢測(cè)可預(yù)測(cè)的NIAS.

例：已知的紫外光固化油墨中某種光引發(fā)劑的降解產(chǎn)物、氯丙醇、丙烯酰胺或由油墨制造商提供的相關(guān)物質(zhì)信息，以及其他用到的添加劑或可能存在的雜質(zhì)。下游用戶可以通過靶向分析檢測(cè)到這些可預(yù)測(cè)的 NIAS.

通過專家判斷和對(duì)可預(yù)測(cè)NIAS的評(píng)估來推測(cè)成分。

現(xiàn)有文獻(xiàn)表明，可以基于理論化學(xué)、分析經(jīng)驗(yàn)和文獻(xiàn)檢索來預(yù)測(cè)一些塑料材料中的眾多NIAS （Bradley, 2007) .從定量的角度來看，可以準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)到一些材料中最相關(guān)的物質(zhì)（如寡聚物、添加劑的主要雜質(zhì)和降解產(chǎn)物）。在該理論實(shí)踐中，儀考慮到了添加劑本身的主要降解途徑，如果知道添加劑中的所有雜質(zhì)且一并考慮，則可能進(jìn)行更元全的預(yù)測(cè)。因此，對(duì)這此 NIAS的預(yù)測(cè)，取決于嚴(yán)始階段所用到的基本信息，包括諸如雜質(zhì)的物質(zhì)信息以及諸如溫度、壓力、空氣接觸或濕度的工藝條件。信息交換至關(guān)重要，GMP章節(jié)中也會(huì)強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)。

這里給出一個(gè)可預(yù)測(cè)NIAS的重要范例：偶氮染料PR 176, 是一種用于塑料以及紙和紙板基材上印刷油墨的著色劑。如果對(duì)芳香胺伯胺進(jìn)行分析，根據(jù)顏料的合成應(yīng)該考慮五種結(jié)構(gòu)，并且如果染料中偶氮鍵發(fā)生還原斷裂，則另一種結(jié)構(gòu)也可能變得相關(guān)（圖2) .現(xiàn)行的芳香胺伯胺分析方法主要有分光光度法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（MS) 法。在PR 176案例的遷移研究中，發(fā)現(xiàn)合成3-氨基－4-甲氧基苯甲酰苯胺和5-氨基苯并咪唑酮的中間體有遷移到食品模擬物中。

對(duì)所用顏料以及萘甲酸衍生物中所有可預(yù)測(cè)的NIAS進(jìn)行評(píng)估時(shí)，必須考慮起始物中的偶聯(lián)劑、雜質(zhì)和芳香胺伯胺。

用于模擬 NIAS形成的預(yù)測(cè)工具

據(jù)作者所知，目前尚未開發(fā)出可預(yù)測(cè)NIAS形成或存在于FCM中的計(jì)算機(jī)模型。文獻(xiàn)檢索、有機(jī)化學(xué)知識(shí)和產(chǎn)品知識(shí)是預(yù)測(cè)可能形成哪些 NIAS的主要信息來源。

步驟4. 以前在FCM或起始物中檢測(cè)到的可預(yù)測(cè)的 NIAS.

已有報(bào)道確定在某些FCM和（或）IAS中存在的NIAS, 也可以作為本專著中所指的可預(yù)測(cè)NIAS.需要考慮過去在研究FCM或起始物時(shí)所發(fā)現(xiàn)的可預(yù)測(cè)的 NIAS.例如，再生紙和紙板中的礦物油、涂料中的雙酚A二縮水甘油醚的水合物（HCI/H, 0) 、紙和紙板中的三氯丙二醇，這些可預(yù)測(cè)的 NIAS都應(yīng)該被考慮到。應(yīng)通過特定遷移研究或?qū)＜遗袛鄟碓u(píng)估可能存在的 NIAS.基于可獲得的文獻(xiàn)資料，可以提出哪些 NIAS 可能與所研究的 FCM 或起始物相關(guān)。本書附錄給出了部分文獻(xiàn)摘要。

NIAS的另一個(gè)信息來源可能是FCM 或起始物制造商的分析實(shí)驗(yàn)室，或?qū)λ芯康?nbsp;FCM 或起始物具有豐富經(jīng)驗(yàn)的外部實(shí)驗(yàn)室。這些實(shí)驗(yàn)室很可能掌握具體的分析數(shù)據(jù)，如所用起始物的色譜峰。這可能會(huì)相當(dāng)復(fù)雜，例如，由幾十個(gè)或幾百個(gè)峰組成的預(yù)聚物的色譜圖。這種信息應(yīng)該是GMP的一部分（參見第3章）， 并可用于分析起始物中被檢測(cè)到的其他物質(zhì)。此外，這些譜圖也可以用于分析不同批次產(chǎn)品的質(zhì)量是否發(fā)生改變。

步驟5. 對(duì)以前未檢測(cè)到的且難以預(yù)測(cè)的“不可預(yù)測(cè)的 NIAS”進(jìn)行評(píng)估。

該步驟涉及對(duì)不可預(yù)測(cè)的NIAS的分析評(píng)估，這些NIAS之前未被檢測(cè)到，也無法根據(jù)該系統(tǒng)的化學(xué)知識(shí)進(jìn)行預(yù)測(cè)。如，這些NIAS可以是存在于經(jīng)復(fù)雜化學(xué)過程制造的產(chǎn)品（如涂料、橡膠和黏合劑）中的污染物和反應(yīng)產(chǎn)物。可采用非靶向篩查分析技術(shù)來評(píng)估這些“不可預(yù)測(cè)的NIAS”。

本專著中“不可預(yù)測(cè)的NIAS”的一個(gè)典型范例是過程污染物。這些 NIAS可以用非靶向分析篩查技術(shù)進(jìn)行評(píng)估。由于這一類NIAS是不可預(yù)測(cè)的，應(yīng)確保所采用的非靶向分析篩查方法能檢測(cè)到眾多不同理化性質(zhì)的物質(zhì)（見5. 1. 2節(jié)）。

圖3顯示了遷移物的類型以及基于遷移試驗(yàn)的“已知”或“未知”遷移物分類。一方面，它可以根據(jù)符合性聲明中的典型信息（由測(cè)試實(shí)驗(yàn)室提供的已知遷移物）對(duì)遷移物進(jìn)行識(shí)別，另一方面，它也可以對(duì)其他遷移物進(jìn)行識(shí)別。其他信息可由測(cè)試機(jī)構(gòu)與FCM制造商共同收集（由測(cè)試實(shí)驗(yàn)室提供的未知遷移物）。

NIAS的化學(xué)分析

對(duì)5. 1節(jié)中描述的“可預(yù)測(cè)的NIAS"和“不可預(yù)測(cè)的 NIAS”的分析，可以考愿兩種主要的分析方法：

1、靶向分析法，用于分析＂可預(yù)測(cè)的NIAS該方法也可同時(shí)用于分析“不可預(yù)測(cè)的NIAS”，靶

向法可包括靶向分析方法和篩查方法。

2, 非靶向方法或篩查方法，用于分析多種不同理化性質(zhì)的物質(zhì)。這主要涉及“不可預(yù)測(cè)的NIAS”，的檢測(cè)；但如果產(chǎn)品中存在前序生產(chǎn)環(huán)節(jié)的“可預(yù)測(cè)的NIAS”和IAS, 也可用于檢測(cè)這些物質(zhì)。

在NIAS的分析方法中，兩組方法都應(yīng)具有檢測(cè)和定量能力，或者是具備估算遷移溶液或提取液中痕量化合物含量水平的能力。在歐盟法規(guī)10/2011中。規(guī)定了對(duì)于在多層材料的功能阻隔層的外層所用到的、且未在清單中列出的、不屬于致癌／致突變／生殖毒性（CMR) 的物質(zhì)均不得檢出（《10ug/kg食物）。這就意味著，靶向分析和篩查分析方法的檢測(cè)下限都應(yīng)達(dá)到ug/kg食物的水平。應(yīng)該意識(shí)到，在具有一定檢測(cè)能力的遷移試驗(yàn)中，所有FCM都會(huì)釋放出可被檢測(cè)到的 NIAS.因此，要求NIAS不發(fā)生遷移是不切實(shí)際的。作為一個(gè)可行性措施，針對(duì)NIAS確定的10ug/kg食物遷移限值或關(guān)注水平（LOI) (參見5節(jié)）也可用于非阻隔材料。在確定暴露量的（估計(jì)性）定量分析中，需要考慮一個(gè)重要事實(shí)，即通過不同的食物可以導(dǎo)致同一種遷移物的暴露（如不同食物由同種起始物制成的材料包裝）。在進(jìn)行（估計(jì)）定量分析之前，應(yīng)考慮暴露情況（參見5. 4節(jié)）， 并且應(yīng)該確定切合實(shí)際和滿足需求的檢測(cè)限（LOD) .

除了使用爬向和非爬向分析方法之外，還存在這樣一種情況：發(fā)生遷移的相似分予的總和也可能提供重要信息。例如，聚酯寡緊物可以人工水解成小分子以模擬這些寡緊物進(jìn)人人作后發(fā)生的水解過程。這樣就能估計(jì)一個(gè)人暴露的分子類型和總量。同樣的程序可以對(duì)寡聚物的組成進(jìn)行總體措述，包括所用的單體類型和數(shù)量以及端基官能團(tuán)。

另一個(gè)可能有助于更好了解NJAS遷移的工具是確定FCM的總遷移量。將總遷移量與使用想向和非靶向分析方法得到的結(jié)果相比較，應(yīng)用質(zhì)量守恒，將得到靶向和非靶向分析所檢測(cè)到的 NIAS和未被檢測(cè)到的NIAS的比例。需注意的是，這個(gè)過程很容易出現(xiàn)較大的分析誤差。

應(yīng)當(dāng)注意的是，在評(píng)估FCM時(shí)，不一定會(huì)用到所有的分析技術(shù)。在很多情況下，選擇分析技術(shù)應(yīng)該基于“具體情況具體分析”的原則。

對(duì)“可預(yù)測(cè)的NIAS”進(jìn)行靶向定量分析

可用靶向分析法對(duì)“可預(yù)測(cè)的NIAS”進(jìn)行分析。對(duì)于該項(xiàng)評(píng)估，應(yīng)使用與所研究的NIAS相同或結(jié)構(gòu)非常相似（同位素標(biāo)記）的內(nèi)標(biāo)物，這樣可以保證內(nèi)標(biāo)物在檢測(cè)器上的響應(yīng)值和 NIAS 相同或非常相似?？梢杂媚MFCM預(yù)期用途的遷移條件獲得遷移物。靶向分析時(shí)應(yīng)添加一種或多種內(nèi)標(biāo)物，且添加水平應(yīng)落在NIAS遷移量的預(yù)期范圍之內(nèi)還可以考慮是否需要采用最嚴(yán)苛的情形來計(jì)算遷秒量，即利用 FCM 的成分?jǐn)?shù)據(jù)或提取物數(shù)據(jù)，并假以會(huì)100%轉(zhuǎn)移到食品中。

對(duì) “可預(yù)測(cè)的 NIAS"進(jìn)行非靶向分析或篩查

篩查分析法可用于“不可預(yù)測(cè)的 NIAS”的檢涮，也可用于“可預(yù)測(cè)的 NIAS”以及IAS的檢測(cè)。在該類方法中，用一種或多種食品模擬物或提取溶劑對(duì)FCM 或起始物進(jìn)行提取，然后用若干種分析方法進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，盡可能覆蓋到所有可能存在的物質(zhì)，如用頂空／固相微萃?。⊿PME) 、火焰離子化檢測(cè)（FID) 器或氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)揮發(fā)性物質(zhì)；氣相色譜－質(zhì)譜／火焰離子化檢測(cè)器（GC-MS/FID)或氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)半揮發(fā)性物質(zhì)；液相色譜－紫外檢測(cè)（LC-UV) 、液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測(cè)（ELSD) 或高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS) 法檢測(cè)非揮發(fā)性化合物和極性化合物；電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測(cè)痕量元素；磁共振（NMR) 進(jìn)行

通用性篩查。高分辨率氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法也可用于NIAS的分析。需要考慮分子量高達(dá)1000Da的NIAS, 但分子量超過1000Da的 NIAS通常認(rèn)為與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估無關(guān)（EFSA, 2008) , 因此不予考慮。

篩查方法將在下面的段落中介紹。應(yīng)評(píng)估FCM的成分來判斷所用的分析技術(shù)是否足以涵蓋所有類別的待預(yù)測(cè)物。當(dāng)材料中可能含有上述技術(shù)無法檢測(cè)的物質(zhì)和毒理學(xué)相關(guān)的物質(zhì)時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用其他的分析方法，如離子物質(zhì)篩查方法。遷移或提取實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)指南進(jìn)行，例如，歐盟法規(guī)10/2011關(guān)于食品接觸塑料材料和制品的法規(guī)的附件V (EU, 2011) , 以及EUR 23814¹法規(guī)，

其中涉及與不同 FCM 相關(guān)的若干歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CEN）方法。

【EUR 23814 EN-聯(lián)合研究中心－健康和消費(fèi)者保護(hù)研究所，食品接觸物品的測(cè)試條件指南（重點(diǎn)是廚具）－CRL-NRL-FCM出版物，2009年第1版?！?/span>

常用的方法是用溶劑萃取開始NIAS的篩查以獲得高濃度的待分析物（和NIAS) .這樣會(huì)潛在的 NIAS濃度很高，從而更容易鑒定。此外，可以采用內(nèi)標(biāo)法定量估計(jì)NIAS濃度以便能基于最嚴(yán)苛的遷移情形計(jì)算檢測(cè)的 NIAS的遷移水平。如果檢測(cè)到可能超過關(guān)注水平的潛在NIAS, 則可以在實(shí)際遷移條件下進(jìn)行遷移試驗(yàn)，以確定 NIAS是否遷移以及遷移水平。

通過與色譜庫(kù)、已知FCM的精確數(shù)據(jù)庫(kù)以及用于生產(chǎn)FCM的起始材料的潛在NIAS數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較，可以確定超過或可能超過關(guān)注水平的氣相色譜或液相色譜色譜圖中的每個(gè)峰的身份。如果沒有數(shù)據(jù)庫(kù)可用或匹配質(zhì)量不足，可以基于碎片模式和計(jì)算公式進(jìn)行預(yù)測(cè)。

同時(shí)分析模擬物或萃取溶劑和所購(gòu)買的或合成的分析標(biāo)準(zhǔn)品，可以用來確認(rèn)溶劑提取物或遷移物中的物質(zhì)特性和定量濃度。

篩查分析不一定能夠完全鑒定 NIAS.篩查分析可以檢測(cè)到物質(zhì)，但不可能進(jìn)行完全鑒定（Nerin等，2013) , 文獻(xiàn)已報(bào)道了許多這樣的例子。需注意的是，完全鑒定并不是必須的，因?yàn)橹挥谐^關(guān)注水平的物質(zhì)才需要鑒定。除了鑒定NIAS之外，起始物或材料的色譜圖或磁共振指紋圖可用來確定哪些信號(hào)是在實(shí)際加工過程產(chǎn)生的，哪此信號(hào)是來源于所用的原料。

如果 NIAS 濃度超過關(guān)注水平，則 NIAS評(píng)估的目標(biāo)就是要進(jìn)行完全鑒定，但有時(shí)候這并不可行，也不必要，因?yàn)椴糠骤b定的物質(zhì)可有助于將無法鑒別的NIAS劃分為特定類別，并且可提示這些無法鑒別的NIAS的潛在毒性。

揮發(fā)性物質(zhì)

均勻的 FCM 可以被切成片，并轉(zhuǎn)移到頂空小瓶中。根據(jù)FCM類型，熱解可發(fā)生在材料的分解溫度之下。另外，固相微萃取可用于分析揮發(fā)性物質(zhì)。

半揮發(fā)性物質(zhì)

獲得提取物或遷移物，并在關(guān)注水平處加入內(nèi)標(biāo)。使用可能具有轉(zhuǎn)向極性（極性和非極性柱）的雙柱氣相色譜儀進(jìn)行分析，以便檢測(cè)極性和非極性的半揮發(fā)性物質(zhì)。若把可分析極性物質(zhì)的液相色譜也用作篩查技術(shù)，則可不必使用極性柱。

非揮發(fā)性和極性物質(zhì)

獲得提取物或遷移物，并在關(guān)注水平處加入內(nèi)標(biāo)。通常使用經(jīng)典的反相液相或親水相互作用液相色譜（HILIC) , 經(jīng)梯度洗脫，使用諸如蒸發(fā)光散射檢測(cè)或電暈放電氣溶膠荷電檢測(cè)－質(zhì)譜儀進(jìn)行分析。使非揮發(fā)性分子更易揮發(fā)的GC-MS衍生技術(shù)也是經(jīng)常使用的方法。

未知NIAS的定量估計(jì)

我們通常使用含系列濃度已知物的標(biāo)準(zhǔn)品來分析和測(cè)定提取物或遷移介質(zhì)中的已知物。但當(dāng)

遷移物未知時(shí)，這種方法則不可行，而NIAS通常屬于這種情況?？赏ㄟ^與內(nèi)標(biāo)物響應(yīng)值比較的方式，來估計(jì)既定物質(zhì)的濃度。考慮到NIAS范圍廣，選擇對(duì)多個(gè)分析物有良好響應(yīng)的檢測(cè)器（即所謂的迪用檢測(cè)器）是非常重要的。因此，用于定量估計(jì)分析的內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)值應(yīng)與要估計(jì)的NIAS的響應(yīng)值相似。通過這種方式，可以獲得每個(gè)NIAS的合理估算濃度。若需要，在鑒定 NIAS時(shí)，可以使用特足標(biāo)準(zhǔn)品來制備校準(zhǔn)曲線，從而確定提取物或遷移介質(zhì)中NIAS的精確濃度和暴露量。需注意的是，當(dāng)遷移物濃度低于關(guān)注水平時(shí)，不需要鑒定未知的NIAS.

對(duì)于氣相色譜，火焰離子化檢測(cè)器往往能給通用響應(yīng)。而電子電離質(zhì)譜（E-MS) 和化學(xué)電離

（CI) 質(zhì)譜可以通過譜庫(kù)檢索進(jìn)行簡(jiǎn)單的物質(zhì)鑒定，但物質(zhì)響應(yīng)值的變化可能比火焰離子化檢測(cè)器的多。定量估計(jì)分析領(lǐng)域的最先進(jìn)技術(shù)是使用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行成分鑒定，以及使用氣相色譜、質(zhì)譜／火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行定量估計(jì)，后者是根據(jù)FCM的化學(xué)性質(zhì)添加了一系列內(nèi)標(biāo)物。對(duì)于液相色譜，可使用對(duì)半揮發(fā)性物質(zhì)和非揮發(fā)性物質(zhì)有通用響應(yīng)的氣溶膠檢測(cè)器（如蒸發(fā)光散射檢測(cè)）、荷電氣溶膠檢測(cè)器（CAD) 和納克級(jí)激光計(jì)數(shù)檢測(cè)器（NQAD) , 其區(qū)別取決于分子官能團(tuán)。需注意的是， 不同物質(zhì)響應(yīng)值會(huì)發(fā)生變化，除非所用內(nèi)標(biāo)物在結(jié)構(gòu)上與要測(cè)定的NIAS非常相似或相同。對(duì)于大多數(shù)非揮發(fā)性物質(zhì)，上述檢測(cè)器響應(yīng)值的差異通常小于一個(gè)數(shù)量級(jí)。在分析中使用多個(gè)內(nèi)標(biāo)物也是合適的。但是，揮發(fā)性物質(zhì)不能被氣溶膠檢測(cè)器靈敏地檢測(cè)，也不可能通過內(nèi)標(biāo)進(jìn)行可靠的定量估計(jì)，這些物質(zhì)應(yīng)通過頂空或固相微萃取進(jìn)行檢測(cè)。這些物質(zhì)用光散射技術(shù)進(jìn)行鑒定是不可行的。

高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法（主要是電噴霧電離）是另一種廣泛用于分析非揮發(fā)性物質(zhì)

的技術(shù)。其中主要用到的是電噴霧電離技術(shù)，但他有使用其他的替代電離技術(shù)，例如大氣壓化學(xué)電離（APCI) 和大氣壓光電離（APPI) 技術(shù)。高分辨率質(zhì)譜法可以提供所檢測(cè)分子的元素組成信息。碎片化技術(shù)可將檢測(cè)到的分子碎片化，產(chǎn)生含有這些分」結(jié)構(gòu)信息的特異性碎片譜圖。該技術(shù)的檢測(cè)靈敏度是無與倫比的。高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用的主要缺點(diǎn)是，檢測(cè)器可能對(duì)基質(zhì)中不同分子的響應(yīng)值存在很大差異，開展定量估計(jì)分析時(shí)比其他液相色譜檢測(cè)器更困難。

應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，使用高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用難以進(jìn)行定量估計(jì)，因?yàn)檫@需要結(jié)構(gòu)上相同或相似的標(biāo)準(zhǔn)品。當(dāng)高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用用于NIAS篩查時(shí)，盡可能采用現(xiàn)有手段對(duì)所有檢測(cè)到的物質(zhì)進(jìn)行定性、定量和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

在FCM遷移檢測(cè)中，由于所發(fā)現(xiàn)物質(zhì)的身份和濃度是未知的，因而無法得到分析物的回收率（見5節(jié)）。因此，應(yīng)基于遷移試驗(yàn)?zāi)M物添加一種或多種物質(zhì)（覆蓋一系列化學(xué)性質(zhì)，例如極性和揮發(fā)性）來計(jì)算回收率。此外應(yīng)注意，要確保分析方法的檢測(cè)限適于確定相關(guān)濃度的物質(zhì)。

除了色譜方法，近來磁共振已被證明是一種有效工具，即使無法獲得遷移分子的完整結(jié)構(gòu)，也可用于定量（或至少是估計(jì)）結(jié)構(gòu)單元的濃度。實(shí)際的例子有很多，如測(cè)定遷移的聚硅氧烷、鄰苯二甲酸酯類增塑劑、從橡膠中釋放的芳族部分、聚烯烴低聚飽和烴中的不飽和部分，等等（Helling等，2012) .

非靶向篩查的局限性

定量估計(jì)和不確定性

在分析化學(xué)中，通過使用與待定量目標(biāo)物（這里指NIAS) 有相似響應(yīng)或使用已知檢測(cè)器響應(yīng)值

的內(nèi)標(biāo)物來實(shí)現(xiàn)定量分析。對(duì)于無法預(yù)測(cè)的NIAS,需要使用非靶向篩查來檢測(cè)這些物質(zhì)。由于不知道會(huì)檢測(cè)到哪種物質(zhì)，因此無法選擇與NIAS有相似檢測(cè)器響應(yīng)值的內(nèi)標(biāo)物。目前最實(shí)際的做法是，使用其響應(yīng)值與分析物的理化性質(zhì)無關(guān)的檢測(cè)器，如5.節(jié)中討論的氣相色譜－質(zhì)譜／火焰離子化檢測(cè)器和（或）氣溶膠檢測(cè)器。選擇內(nèi)標(biāo)物時(shí)、應(yīng)該讓檢測(cè)器對(duì)該內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)值與他類物質(zhì)存在相關(guān)性。可優(yōu)先考慮的是，與其他物質(zhì)相比，內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)值應(yīng)該相對(duì)低些，以確保所測(cè)定的不可預(yù)測(cè)的NIAS的遷移量代表了最嚴(yán)苛情形。

例如，將氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用中內(nèi)標(biāo)物二氟聯(lián)苯的響應(yīng)值與含有不同官能團(tuán)的23 種物質(zhì)的混會(huì)物進(jìn)行比較（Koster等，2014) .這些物質(zhì)是：

*烷烴類：十一烷、十二烷、十四烷、十五烷、二十烷，三十烷。

*烯烴類：環(huán)辛烯、十八烯、角鯊烯。

*醇類：苯酚、1-辛醇。

*醛／酮類：苯甲醛、癸醛、己內(nèi)酰胺。

*醚：二苯醚。

*羧酸：辛酸、癸酸。

*氯化物：二氯苯、二氯苯酚。

*芳烴：苯甲醚、萘、二甲苯。

*胺：苯胺、丁基芐胺。

對(duì)于大多數(shù)物質(zhì)，檢測(cè)器的響應(yīng)值（峰面積／納克物質(zhì)）高于等量的二氟聯(lián)苯。這表明當(dāng)使用二氟聯(lián)苯作為內(nèi)標(biāo)物時(shí)，高估了大多數(shù)物質(zhì)遷移量的測(cè)定值，表明現(xiàn)有的定量估計(jì)篩查分析相對(duì)保守（Koster等，2014) .此外，可以使用分布在整個(gè)保留時(shí)間的多個(gè)內(nèi)標(biāo)物來改進(jìn)定量估計(jì)分析技術(shù)。

在使用靶向分析技術(shù)時(shí)，待測(cè)化合物是已知的，并且該方法可以用參考物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)。對(duì)于與提取率和其他樣品制備有關(guān)的真實(shí)性或偏差問題，可以用含有已知化合物的參考物質(zhì)進(jìn)行檢查。但是，上述方法不適用于未知 NIAS, 存在不確定性。

鑒定

雖然電子電離質(zhì)譜是分析化學(xué)中用于鑒定未知物的最佳檢測(cè)器，但是所記錄的質(zhì)譜圖可能在質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)中不存在。有經(jīng)驗(yàn)的質(zhì)譜儀技術(shù)人員可以人工解析質(zhì)譜，并導(dǎo)出所涉及的分子結(jié)構(gòu)（或至少給出提示）。對(duì)物質(zhì)的初步鑒定，應(yīng)使用待測(cè)目標(biāo)物的商品化參考物，或是與初步確定的 NIAS結(jié)構(gòu)類似的參考物。保留時(shí)間（或保留指數(shù)）可能有助于此確認(rèn)工作。化學(xué)電離是另一種可用于確證所檢出NIAS分子量的方法。

高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用是分析非極性分子以及串聯(lián)質(zhì)譜期間產(chǎn)生的碎片量的極佳檢測(cè)

器。然而，目前缺乏與這些方法有關(guān)的物質(zhì)譜圖數(shù)據(jù)庫(kù)，因此與電子電離質(zhì)譜方法相比，對(duì)高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用所測(cè)物質(zhì)的鑒定往往更加困難。一些高分辨率液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)，如飛行時(shí)間質(zhì)譜（TOF-MS) 、軌道阱和傅里葉變換質(zhì)譜（FT-MS) , 可將NIAS的質(zhì)量精確記錄到小數(shù)點(diǎn)后4 位或5位，這樣就能夠確定所檢測(cè)到NIAS的元素組成。

即使已經(jīng)花費(fèi)了大量時(shí)間來試圖鑒定出未知的NIAS, 但可能仍無法實(shí)現(xiàn)。如果這種未知NIAS的估計(jì)暴露量超過關(guān)注水平，則應(yīng)考慮其他分析技術(shù)，例如磁共振。如果這些技術(shù)還不能鑒定 NIAS, 可以考慮使用目前認(rèn)為是合適的毒理學(xué)關(guān)注閾值方法。

回收率

另一個(gè)與遷移物中NIAS定量估計(jì)分析相關(guān)的問題是，非靶向篩查無法估計(jì)相應(yīng)NIAS的回收率。由于分析物及其理化性質(zhì)是未知的，因此所用的提取或遷移條件可能是不適用的，例如從FCM 中提取全氟辛酸（PFOA) (Begley等，2005).另外，在提取或過移、樣品預(yù)處理租公析之后，分析物可能不穩(wěn)足，或者可能因不可道的吸附、沉淀、蒸發(fā)等們?nèi)ナ?。只要未知NIAS的身份無法明確，就不可能對(duì)回收率進(jìn)行校正。

對(duì)該問題的實(shí)用處理方式是，在遷移試驗(yàn)的浸泡接觸之前添加一種或多種內(nèi)標(biāo)，以便能夠觀察這些分析物的回收率是否可接受，但這種處理方式也有局限性。應(yīng)當(dāng)注意，內(nèi)標(biāo)的回收率不一定與NIAS的回收率有可比性，因?yàn)閮烧叩睦砘再|(zhì)可能完全不同。如果 NIAS的遷移已經(jīng)超過關(guān)注水平，應(yīng)使用合適的內(nèi)標(biāo)來鑒定 NIAS, 并開展針對(duì)NIAS的特定遷移量檢測(cè)。

同源化合物

非靶向篩查試驗(yàn)往往檢測(cè)的是單一物質(zhì)，但一些 NIAS可能由許多結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)組成，需要考慮這些物質(zhì)聯(lián)合暴露可能帶來的累積效應(yīng)問題。例如礦物油，其中包含一大類結(jié)構(gòu)相似、可進(jìn)行色譜分離的物質(zhì)。如果僅進(jìn)行篩查分析，可能漏過可色譜分離的結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)。應(yīng)用可檢測(cè)一大類物質(zhì)的技術(shù)（如磁共振）可能是一種有效解決方案。

未檢測(cè)到的 NIAS

開發(fā)非靶向篩查技術(shù)，可以檢測(cè)到那些包含不同理化特性物質(zhì)的 NIAS.然而有一種可能是，一個(gè)未知NIAS的理化特性并不在所用的非靶向篩查技術(shù)范圍內(nèi)。因此，應(yīng)通過合理選擇所預(yù)測(cè)的NLA 的提取或遷移程序、分析技術(shù)以及相關(guān)背景或評(píng)研結(jié)果，來減少這種情況發(fā)生的概率。需注意的是，起始物的信息可以為擬用于評(píng)價(jià) NIAS的分析方法提供有價(jià)值的信息，其中也包括專家判斷。

使用衍生化技術(shù)的氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用可能有助于檢測(cè)其他技術(shù)難以檢測(cè)到的NIAS.而共洗脫技術(shù)可能無法檢測(cè)到一些低豐度的 NIAS。

 NIAS 的危害識(shí)別和危害特征描述

危害識(shí)別和危害特征描述是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的重要步驟。危害識(shí)別的目的是識(shí)別化學(xué)物質(zhì)對(duì)相關(guān)人群帶來的潛在不良健康影響。危害識(shí)別需要對(duì)相關(guān)科學(xué)信息進(jìn)行充分審查并進(jìn)行完整記錄。這些科學(xué)信息可以來自合適的數(shù)據(jù)庫(kù)、同行評(píng)議的文獻(xiàn)和（或）研究報(bào)告（如果可用的話）。危害識(shí)別方法強(qiáng)調(diào)研究資料的重要性，排序?yàn)椋喝祟悾餍胁W(xué)／安全性）研究、動(dòng)物毒理學(xué)研究、體外生物測(cè)試，以及最后的交叉參照和（定量）構(gòu)效關(guān)系。

危害特征描述主要描述關(guān)鍵毒性效應(yīng)的量效關(guān)系。通常而言，它既可以得到安全暴露水平（例如每日可接受攝入量）， 也可以得到與預(yù)設(shè)風(fēng)險(xiǎn)水平相關(guān)的暴露水平。

FCM被批準(zhǔn)在歐盟使用前，應(yīng)對(duì)FCM中的遷移物質(zhì)進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)價(jià)。當(dāng)NIAS的屬性已知時(shí)，毒理學(xué)研究也可以作為物質(zhì)開發(fā)過程中的一個(gè)選擇。在這種情況下，進(jìn)行NIAS評(píng)估所需的毒理學(xué)數(shù)據(jù)是一樣的，并且取決于預(yù)期的遷移水平：

*遷移量《0. 05mg/kg食品或食品模擬物：包括不同毒性終點(diǎn)的三個(gè)致突變?cè)囼?yàn)。歐洲食品安全局現(xiàn)在討論將其改為兩個(gè)致突變?cè)囼?yàn)（譯者注：目前已正式修改為兩個(gè)致突變?cè)囼?yàn)）； 如果無法通過改變技術(shù)參數(shù)或更換材料來規(guī)避NIAS的疑似遺傳毒性，則其暴露邊距（MOE) 應(yīng)至少達(dá)到10000（EFSA, 2012c) 或不應(yīng)超過最低毒理學(xué)關(guān)注閾值0. 0025μg/ (kgbw·d) ;

* 在0. 05mg/kg《遷移最＜5mg/kg之間的食品或食品模擬物：除了第一條要求之外，另外需要開展90天經(jīng)口毒性試驗(yàn)和證明沒有潛在人體備積性的數(shù)據(jù)；

*遷移量》5mg/kg食物或食物模擬物：除第二條要求外，要進(jìn)行吸收、分布、代謝和排泄試驗(yàn)，以及開展生殖毒性（一個(gè)種屬）、發(fā)育毒性和長(zhǎng)期毒性／ 致癌性研究（通常兩個(gè)種屬）。

在沒有毒理學(xué)數(shù)據(jù)的情況下，可以應(yīng)用毒理學(xué)關(guān)注闕值方法進(jìn)行危害評(píng)估（Kroes等，2004) .基于物質(zhì)的化學(xué)特性，可以使用包括 Cramer等人公布的毒理學(xué)關(guān)注閾值決策樹（DT) 分類來確定化學(xué)物類別（Cramer 等，1978) .然而，此項(xiàng)工作需要得到暴露數(shù)據(jù)。毒理學(xué)關(guān)注閾值不適用于含有未知物的混合物。在開放的應(yīng)用程序 Toxtree 中，有自動(dòng)化的決策樹應(yīng)用工具（免費(fèi)下載網(wǎng)址：http: //toxtree. sourceforge.net/) .應(yīng)當(dāng)注意，在Toxtree分類決策樹中，既可以使用原始 Cramer 分類方法，也可以使用基于最新科學(xué)知識(shí)校正的 Cramer 分類方法。

體外生物測(cè)試方法的應(yīng)用

通常而言，已知NIAS的毒理學(xué)數(shù)據(jù)不足或緣失會(huì)導(dǎo)致危害識(shí)別和危害特征描述極具挑戰(zhàn)性。此外，有超過一半的遷移物是未知的 NIAS (Grob等，2006) , 因此，無法檢索到特定物質(zhì)的毒理學(xué)數(shù)據(jù)。目前，學(xué)術(shù)界已逐漸意識(shí)到，獲取所有物質(zhì)的鑒別或定量信息及其全部毒理學(xué)特性的傳統(tǒng)方法實(shí)際上不實(shí)用（需要大量資源）也不可?。涸S多 NIAS暴露水平可能非常低，無法在體內(nèi)試驗(yàn)中產(chǎn)生誘導(dǎo)效應(yīng)。另外，這種復(fù)雜混合物的毒性相互作用仍未定論。

相反，研究者越來越側(cè)重干使用體外生物測(cè)試和生物信息毒性評(píng)價(jià)的非肥向篩查方法。在危害識(shí)別中，體外細(xì)胞增養(yǎng)測(cè)定方法（體外生物測(cè)試）是一種非常有用的毒性終點(diǎn)篩查工具，可用于諸加細(xì)胞毒性、遺傳毒性和潛在的內(nèi)分泌活性的篩查。目前普遍認(rèn)為，采用短期體外生物測(cè)試可以在桃高速度、降低成本和減少動(dòng)物使用等方面發(fā)揮越來趣大的作用。體外生物測(cè)試一直被用來評(píng)估環(huán)境中極低水平的復(fù)雜混合物的危害（Depledge 和 Fossi, 1994;Walker等，1996; Calow, 1998) .體外生物測(cè)試必須與化學(xué)分析結(jié)合使用，這一點(diǎn)已被科學(xué)界普遍接受。體外生物測(cè)試的主要優(yōu)點(diǎn)是將污染物作為整體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可以檢測(cè)未知，未定量和（或）未檢出的化學(xué)物的危害。不過，危害評(píng)估需要一系列體外生物測(cè)試方法的組合。

目前，使用一系列體外生物測(cè)試方法是環(huán)境領(lǐng)域的監(jiān)管要求（即關(guān)于廢物危害分類的歐盟委員會(huì)指令2008/98/CE) (EC,2008),可用來評(píng)估地表水質(zhì)量（歐盟委員會(huì)水框架指令2000/60/EC) (EC,2000) .針對(duì)合成聚合物使用體外生物測(cè)試方法也有法規(guī)依據(jù)。但如何應(yīng)用取決于設(shè)備與人體接觸的類型（DIN, 2003) .

對(duì)于FCM 和NIAS, 采用體外生物測(cè)試方法可獲取遷移物或提取物其他生物活性方面的危害

信息，特別是這些物質(zhì)是復(fù)雜混合物時(shí)。這是因?yàn)榛旌衔锏淖罱K相互作用可能是增加或減少某種

效應(yīng)，這種效應(yīng)可以發(fā)生在FCM提取物的NIAS 和（或）IAS之間，也可能發(fā)生在各種物質(zhì)組合之間。其他方法可能不大容易檢測(cè)到這些效應(yīng)，目前也沒有可獲得的相互作用閾值（盡管作為一種實(shí)用方法，對(duì)具有相同作用模式的物質(zhì)推薦測(cè)定累積效應(yīng)）。

在可能存在特定危害（例如內(nèi)分泌活性物質(zhì)）的情況下，應(yīng)用特殊的體外生物測(cè)試方法可以更多地了解遷移物質(zhì)的生物活性（EFSA, 2012) .體外生物測(cè)試可以提供混合物危害評(píng)估的綜合信息，因?yàn)樗鼈兛梢蕴崾静煌M分之間可能發(fā)生的相互作用。如果混合物劑量非常低，一般認(rèn)為其累積效應(yīng)的健康意義可能會(huì)非常小，以至于使用校正因子來覆蓋可能存在的累積效應(yīng)的必要性不大甚至沒有必兩（Leeman 等，2013) .對(duì)于一些已知的污染物，如內(nèi)分泌干擾物和遺傳毒性致癌物，可能需要考慮低劑量的聯(lián)合效應(yīng)（Welshons等，2003; Kortenkamp等2011) .

然而，現(xiàn)階段所用的最先進(jìn)的體外生物測(cè)試技術(shù)并非要取代目前的化學(xué)分析技術(shù)（檢測(cè)物質(zhì)存在的工具）， 或者也不是要用于完整的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估或合規(guī)性評(píng)估，而是作為一種補(bǔ)充手段（特別是對(duì)未預(yù)測(cè)的 NIAS) , 以獲得不良效應(yīng)的作用機(jī)制／作用模式（MoA) , 從而有助于進(jìn)一步的優(yōu)先篩查，這與歐洲食品安全局的意見是一致的（EFSA, 2012c) .

目前有大量的測(cè)試方法可用。體外生物測(cè)試可以是半定量方法，給出“是”或“否”的評(píng)價(jià)，并提供毒理學(xué)作用模式方面的信息，例如遺傳毒性、細(xì)胞毒性或潛在的內(nèi)分泌活性。特定體外生物測(cè)試或一系列體外生物測(cè)試組合是否必要以及如何進(jìn)行選擇，取決于待評(píng)估的毒性靶點(diǎn)和待評(píng)價(jià)時(shí)FCM (例如，是否希望體外生物測(cè)試為毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)提供更多有價(jià)值的信息）， 這些工作也依積于專家判斷。表6列述了一此目前正在研發(fā)的件外生物測(cè)試方法，重點(diǎn)在于測(cè)試低劑量的作用機(jī)制／作用模式（遺傳毒性和受體介導(dǎo)的潛在內(nèi)分泌活性）。

表6 目前用于NIAS研究的體外生物測(cè)試方法

“主要用于監(jiān)控目的。

目前，以下體外生物測(cè)試已用于FCM 提取物的評(píng)估和（或）監(jiān)控：

*遺傳毒性測(cè)試：按管理要求使用一套遺傳毒性試驗(yàn)評(píng)估塑料類FCM遷出的高純度 NIAS的遺傳毒性（EFSA. 2008) .歐盟法規(guī)要求進(jìn)行三種遺傳素性試驗(yàn)。

*高通量遺傳毒性測(cè)試：用于評(píng)估紙板類FCM中遷移物或提取物的NIAS (Hughes等，2012; Kosto:等，2014) .

*特定的人源細(xì)胞毒性測(cè)試：用于檢測(cè)接觸了輸送管道的飲用水中的未知污染物和 NIAS (AFNOR 1996) .

*基于芳香烴（Ah) 受體的體外生物測(cè)試法：用于定量檢測(cè)二唔英和二喂英類物質(zhì)的毒性當(dāng)量（EC589/2014) (EC,2014).該法規(guī)允許將Ah受體測(cè)試方法用作篩查工具。

目前，已開發(fā)了許多體外生物測(cè)試方法（例如細(xì)胞毒性、遺傳毒性和內(nèi)分泌干擾活性）并經(jīng)過（預(yù)）驗(yàn)證。一個(gè)關(guān)于包裝紙生物安全的歐洲項(xiàng)目（BIOSAFEPAPER) 評(píng)估了它們?cè)谑称方佑|用紙和紙板［含有許多未知物和（或）污染物，如回收纖維］的復(fù)雜基質(zhì)中的適用性，由此制定了水提取物的標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞毒性測(cè)定法（食品接觸用紙和紙板合規(guī)性工業(yè)指南） (EN 15845, EN 16418) .而與黏合劑有關(guān)的歐洲項(xiàng)目（MIGRESIVES) 進(jìn)一步檢驗(yàn)了體外生物測(cè)試法用于FCM的可行性（Migresives, 2010)其他測(cè)試方法已被用于預(yù)先篩杳或選擇可疑樣品或新配方，后者能夠替代那此不希望出現(xiàn)的物質(zhì)，也被用于常規(guī)生物監(jiān)控和質(zhì)量管理；這些方法已上不同材料中進(jìn)行測(cè)試，如紙板、聚合物、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯（PET) 、聚氯乙烯（PVC) 、聚苯乙烯”和涂層或生物塑料（EU Eeopack 項(xiàng)目，www.ecopack- Jabel,cu) .

對(duì)于沒有特定歐盟法規(guī)的 FCM (例如紙板）， 可以使用制成品的遷移物開展危害識(shí)別［ILSI Europe. 報(bào)告（Outenio等，2004) , 食品接觸用紙板的 CMP行業(yè)指南］。法國(guó)食品衛(wèi)生安全局（法國(guó)食品，環(huán)境，職業(yè)健康與安全局的前身）和歐洲造紙工業(yè)聯(lián)合會(huì)（CEPI) 推薦采用這種方法作為標(biāo)準(zhǔn)化方法的補(bǔ)充分析方法（AFSSA, 2006) .

已有數(shù)篇關(guān)于體外生物測(cè)試方法的論文發(fā)表。研究發(fā)現(xiàn)，體外生物測(cè)試方法可以區(qū)分非食品

級(jí)和食品級(jí)樣品（Bradley等，2008, 2010) .此外，化學(xué)分析不一定能解釋觀察到的毒性（Honkalam-pi-Hamalainen等，2010; Ozaki等，2004) , 因此建議對(duì)所有遷移物進(jìn)行測(cè)試以降低不確定性（Muncke,2011) .

體外測(cè)定技術(shù)在危害識(shí)別和危害特征描述中的局限性

體外生物測(cè)試在體外系統(tǒng)中的可行性是一個(gè)挑戰(zhàn)，例如如何選擇合適的模型和相關(guān)的毒理學(xué)終點(diǎn)，因?yàn)樗鼪Q定了測(cè)試結(jié)果的質(zhì)量和可靠性。體外生物分析的靈敏度應(yīng)足以檢測(cè)相關(guān)濃度下的生物效應(yīng)，且不應(yīng)導(dǎo)致假陽(yáng)性或陰性結(jié)果。目前尚未證明現(xiàn)階段的遺傳毒性測(cè)試技術(shù)能夠檢測(cè)到低水平（如 ppb級(jí)）的遺傳毒性物質(zhì)。

使用計(jì)算機(jī)模擬工具

在沒有特定毒理學(xué)數(shù)據(jù)的情況下，應(yīng)用計(jì)算機(jī)模擬策略可能有一些優(yōu)勢(shì)。為確保其適用性，需要獲得所研究化學(xué)物的結(jié)構(gòu)信息。此類模型不僅提供化學(xué)物潛在危害性質(zhì)的定性信息（例如遺傳毒性警示結(jié)構(gòu)）， 而且還提供定量信息，例如觀察到不良作用的最低劑量（LOAEI) 或致癌潛能（TDso) , 例如半數(shù)致癌劑量。

可將這此數(shù)據(jù)與暴露估計(jì)值直接比較（Schilter等，2014; Lo Piparo等，2011) .

這種方法已經(jīng)廣泛用于各種研發(fā)領(lǐng)域，并被認(rèn)為對(duì)食品領(lǐng)域至關(guān)重要（Benfenati等，2009; JRC,2010) .目前已確定了一些可能有用的計(jì)算機(jī)模擬模型，但仍需進(jìn)一步做好相關(guān)工作，才能獲得監(jiān)管層面的全面認(rèn)可。

計(jì)算方法

計(jì)算毒理學(xué)基于以下假設(shè)：即化學(xué)物的毒性可以通過其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)。最近，許多模型和方法已被確認(rèn)為可進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用（Schilter等，2014;JRC, 2010) .合適的模型意味著符合目標(biāo)需求，并已依據(jù)國(guó)際公認(rèn)指南進(jìn)行了正確驗(yàn)證。許多模型都側(cè)重于識(shí)別危害或作用機(jī)制／作用模式（如肝毒性、遺傳毒性）。其中包括基于專家知識(shí)或統(tǒng)計(jì)關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)－活性關(guān)系（SARs) , 該方法將特定的毒性效應(yīng)與分子中的片段或亞結(jié)構(gòu)相關(guān)聯(lián)?？梢允褂蒙虡I(yè)軟件（Vedani 等2012) , 通過兩者關(guān)聯(lián)，預(yù)測(cè)諸如核受體結(jié)合（例如雌激素受體）的作用機(jī)制／作用模式終點(diǎn)。定量構(gòu)效關(guān)系（QSAR) 模型的應(yīng)用越來越多，可定量預(yù)測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估相關(guān)的毒性終點(diǎn)，如慢性毒性和致癌潛能（Mazzatorta 等，2008; Venkatapathy等，2004; Lo Piparo等，2014; Contrera, 2011) .除了定量構(gòu)效關(guān)系方法之外，分組／交叉參照方法也已經(jīng)越來越多地被開發(fā)和推廣應(yīng)用以解決毒理學(xué)數(shù)措缺乏的問題。交叉參照方法旨在根據(jù)已有的毒理子評(píng)價(jià)充分的化學(xué)類似物的信息，預(yù)測(cè)特性不明的憶學(xué)物的毒性性質(zhì)或作用終點(diǎn)（Schilter等，2014;Wu等，2010）。

計(jì)算毒理學(xué)在建立關(guān)注水平中的應(yīng)用

在ILSI Europe專家組的框架中，已經(jīng)開發(fā)了一個(gè)體現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架的決策樹，用于整合暴露信息與毒理學(xué)預(yù)測(cè)值（Schilter 等，2014) .在這種決策樹模式中，暴露邊距的大小（預(yù)測(cè)的毒理學(xué)閾值與估計(jì)暴露量的比值）決定了安全關(guān)注水平，并且可以用危害特征描述中標(biāo)準(zhǔn)的默認(rèn)不確定系數(shù)來解釋（例如，種間和個(gè)體間差異）。更重要的是，決策樹充分利用所有可用的數(shù)據(jù)，包括機(jī)制或作用模式方面的信息，確保達(dá)到足夠的保守度。計(jì)算機(jī)模擬工具的局限性任何風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估本質(zhì)上都伴有一定程度的不確定性。在具體的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，不確定性是需要向決策者傳遞的重要內(nèi)容。對(duì)于傳統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，已經(jīng)確定了暴露和危害特征描述中的許多不確定性來源（COT, 2007; EFSA, 2006) .受設(shè)計(jì)方面的影響，一般認(rèn)為應(yīng)用如上所述的決策樹也會(huì)帶來類似于經(jīng)典風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中存在的不確定性（Schilter等，2014) .雖然目前還沒有被普遍接受的定量預(yù)測(cè)慢性毒性和半數(shù)致癌劑量（致癌潛能）的計(jì)算機(jī)模擬工具，但是已出現(xiàn)了很有應(yīng)用前景的模型（Lapenna,

2010; Schilter等，2014) .定量構(gòu)效關(guān)系模型對(duì)慢性毒性和致癌潛能預(yù)測(cè)的平均誤差實(shí)際上很接近實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的生物變異性，意味著使用毒理學(xué)預(yù)測(cè)值可能不會(huì)帶來顯著的額外不確定性（Mazzatorta 等，2008; Lo Piparo 等，2014) .當(dāng)對(duì)一些經(jīng)過驗(yàn)證的模型和方法進(jìn)行整合應(yīng)用時(shí)，效果會(huì)更好?？傮w而言，不確定性分析和其他考量（如個(gè)案分析）表明，如果按照決策樹中建議的那樣進(jìn)行合理整合，計(jì)算機(jī)模擬工具可用來確定安全關(guān)注水平（Schilter 等，2014) .這種情況下必須牢記，應(yīng)用計(jì)算機(jī)模擬方法時(shí)需要了解化學(xué)結(jié)構(gòu)和重要的跨學(xué)科專業(yè)知識(shí)。

 暴露評(píng)估

暴露評(píng)估是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的關(guān)鍵部分，國(guó)際食品法典委員會(huì)將其定義為“對(duì)通過食物及其他相關(guān)來源可能攝入的生物性、化學(xué)性和物理性因素或狀況所進(jìn)行的定性和（或）定量評(píng)估” (CAC, 2003) .IISIEurope 曾發(fā)布從食品包裝材料遷移到食品中物質(zhì)的暴露評(píng)估指南，并經(jīng)2007年3月召開的研討會(huì)審議（Brands 等，2007) .根據(jù)這一指南，可以利用以下信息評(píng)估暴露情況：

*FCM中存在什么物質(zhì)（在5節(jié)中討論）？

*僅對(duì)一種應(yīng)用情形進(jìn)行暴露評(píng)估是否必要，或者暴露評(píng)估需要關(guān)注一種物質(zhì)在不同材料中的應(yīng)用？

*該材料擬與哪些食物接觸？ 

*包裝食品的消費(fèi)量？ 

*評(píng)估暴露時(shí)使用的不同食物消費(fèi)量數(shù)據(jù)的可用性、相關(guān)性和適用性？

開展暴露評(píng)估

ILSI Europe 食品包裝材料中遷移物質(zhì)暴露評(píng)估指南綜述了暴露評(píng)估所需的數(shù)據(jù)，包括：每日食物消費(fèi)量、所關(guān)注的化學(xué)物在每種消費(fèi)食品中的存在習(xí)否及其含量（Brands 等，2007) .

具體來說，下面列出的問題或信息是ILSI Eu-rope在遷移物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南中提到的信息，也適用于NIAS 評(píng)估。更多的具體信息以及如何開展暴露評(píng)估，可以在ILSI Europe 的指南中查找。

消費(fèi)量

*獲得需評(píng)估的相關(guān)人群及其相應(yīng)的食物消費(fèi)量。

*如果需要進(jìn)一步評(píng)估，則應(yīng)依照以下步驟獲取更精確的食物消費(fèi)量：

a.首先收集并比較被視為與評(píng)估相關(guān)的所有食物的消費(fèi)數(shù)據(jù)。

b. 審核食物消費(fèi)數(shù)據(jù)的適用性及其與其包裝的關(guān)系。如，對(duì)食物包裝的描述是進(jìn)食時(shí)的包裝狀態(tài)還是購(gòu)買時(shí)的包裝狀態(tài)？

c.如果僅有食物消費(fèi)數(shù)據(jù)，那么必須通過其他途徑獲得其包裝信息。

d. 確認(rèn)含有所關(guān)注物質(zhì)的包裝。

e.確認(rèn)并列出該包裝材料可能以任何形式包裝的食品。

f. 確定所關(guān)注包裝中的食品消費(fèi)的市場(chǎng)份額?？梢哉J(rèn)為所有或部分被消費(fèi)的食品由所關(guān)注的材料包裝。

g.計(jì)算每種相關(guān)包裝食品的估計(jì)暴露量并相加，從而計(jì)算出總的估計(jì)暴露量。

含量數(shù)據(jù)

*獲得所關(guān)注物質(zhì)在相關(guān)食品中的估計(jì)濃度。對(duì)于第一層的篩選評(píng)估，標(biāo)準(zhǔn)食品模擬物中的檢測(cè)結(jié)果可能足以滿足需要。

*如果需要進(jìn)一步評(píng)估，則應(yīng)依照以下步驟獲取更精確的含量數(shù)據(jù)：

a.將含量數(shù)據(jù)分配到所關(guān)注包裝材料包裝的每類。這可能是模擬物或食品中的含量數(shù)據(jù)，或是兩者都有。也可通過建模手段獲得。

b. 如果缺少含量數(shù)據(jù)，那么可能需要謹(jǐn)慎保守，將某個(gè)范圍的最高值認(rèn)定為濃度值，如特定遷移限量。

c. 確定如何處理檢測(cè)限值和定量限（LOQ) 值?，F(xiàn)已有多種處理方法可用。

暴露評(píng)估

*確定是否可以設(shè)定一個(gè)值，低于該值的暴露可以視作安全或不需要引起健康關(guān)注。

*先用保守方法篩查。有無超過這個(gè)值？如果沒有就無需進(jìn)一步評(píng)估。

*如果超過了保守值，則需采用逐步分層的辦法評(píng)估暴露情況。這包括確定性的、精確性的和概率性的方法。

       *無論使用何種方法，應(yīng)該將消費(fèi)的食品及其包裝和它們的含量數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián)，估算出每種被包裝食品的暴露情況，然后合計(jì)得到總暴露量。若有其他來源的暴露，也應(yīng)合并計(jì)算。

*將每一分層的暴露量與一個(gè)合適的終點(diǎn)相比較，并考慮不確定性。適當(dāng)關(guān)注忠實(shí)于包裝、不同社會(huì)經(jīng)濟(jì)層級(jí)或人種、地區(qū)差異以及敏感人群，若仍然沒有問題，那么無需采用更精確的方法。

遷移評(píng)估

正如第4章所討論的，供應(yīng)鏈的每個(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)當(dāng)對(duì)它們制造和銷售的產(chǎn)品的安全負(fù)責(zé)。這將成》符合性聲明的一部分，并包括 IAS和 NIAS的信息。第4章中明確了在三種不同情況下如何在整個(gè)供應(yīng)鏈中傳遞責(zé)任。

信息類型以及如何獲取需要供應(yīng)鏈上各方支持的信息取決于他們生產(chǎn)或加工材料的類型。例

如，一個(gè)單體的制造商無法用他們的產(chǎn)品進(jìn)行遷移研究，因?yàn)樵搯误w尚未成為食品接觸物品。制造商可能會(huì)為其產(chǎn)品制作峰圖，用來檢查加工等過程的重現(xiàn)性（見5. 2. 4節(jié)，第4步）?？梢酝ㄟ^這些色譜峰圖對(duì)NIAS進(jìn)行定性和定量分析。另一個(gè)范例是最終的食品接觸成品的生產(chǎn)。在這一階段，可以進(jìn)行遷移或提取試驗(yàn)，以進(jìn)一步了解遷移的IAS和NIAS, 見 5. 2. 1節(jié)。

表7是生產(chǎn)塑料制品的供應(yīng)鏈?zhǔn)疽鈭D。也可以針對(duì)其他類型FCM繪制類似的表格，但是，對(duì)于某此FCM很難進(jìn)行可靠的預(yù)測(cè)（如紙和紙板）。表7 針對(duì)供應(yīng)鏈的不同層級(jí)，給出了可用來估算IAS和NIAS 遷移的實(shí)驗(yàn)類型的建議。

遷移試驗(yàn)

如何進(jìn)行遷移試驗(yàn)，見5節(jié)。評(píng)估時(shí)應(yīng)該使用遷移試驗(yàn)的結(jié)果。使用歐盟塑料法規(guī) 10/2011 或其他類型FCM相關(guān)法規(guī)中要求的模擬物、時(shí)間或溫度條件，進(jìn)行FCM的遷移試驗(yàn)（EU, 2011) .對(duì)于森林峰（FOP) 篩查，不推薦使用植物來源的油類，因?yàn)檫@類油本身含有大量可能干擾森林峰篩查的物質(zhì)。相反，可以考慮使用95%乙醇和（或）異辛烷。應(yīng)當(dāng)將遷移物制備成可以上機(jī)檢測(cè)的形式，如在用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法分析之前，可以將3%乙酸的遷移物萃取到有機(jī)溶劑里。

最壞情形計(jì)算

在包裝材料研發(fā)或制造初期，評(píng)估可預(yù)測(cè)的NIAS的遷移量時(shí)，理論上可以通過計(jì)算最壞情形（所有物質(zhì)轉(zhuǎn)移）或用數(shù)學(xué)建模來實(shí)現(xiàn)。

表7 估算塑料材料中NIAS遷移量的可用方法

歐洲塑料制造商協(xié)會(huì)已將一個(gè)計(jì)算最壞情形的例子寫入名為《第19條款下清單中未列人物質(zhì)（NLS) 和非有意添加物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估》 [Risk Assessment Of Non-Listed Substances (NLS) And Not-Intentionally  Added Substances (NIAS) Under Article 19] 的文件中¹。

對(duì)于未識(shí)別的物質(zhì)，以定量分析估計(jì)所確定的殘留水平為基礎(chǔ)，同時(shí)考慮暴露數(shù)據(jù)，可以使用最壞情形計(jì)算來確定NIAS水平低于或高于關(guān)注水平。聚合物和塑料生產(chǎn)商正利用暴露評(píng)估的Matrix項(xiàng)目結(jié)果實(shí)現(xiàn)這一目的，見5節(jié)。

在制造某一基材（如聚合物、紙板等）或配制出某種混合物（如油墨、黏合劑和涂層）時(shí)，包裝組成部分如聚合物、紙板、玻璃、油墨、黏合劑和涂層等的所有制造商應(yīng)當(dāng)進(jìn)行最壞情形遷移評(píng)估（如，計(jì)算假定從材料或制品中100%遷移到食品中的量）。一些包裝材料制造商的歐洲協(xié)會(huì)，如油墨行業(yè)的歐洲印刷油墨協(xié)會(huì)、黏合劑方面的歐洲黏合劑和密封劑工業(yè)協(xié)會(huì)（FEICA) 以及紙板行業(yè)的歐洲造紙工業(yè)聯(lián)合會(huì)，均提出用于選擇原始添加劑的決策樹。最壞情形遷移量計(jì)算可以應(yīng)用于添加劑本身，以及原始添加劑中出現(xiàn)的NIAS.

 遷移的數(shù)學(xué)模型

在歐盟層面，可以運(yùn)用數(shù)學(xué)建模來模擬遷移，評(píng)估預(yù)期的NIAS遷移。歐盟引人了這一手段，采用普遍認(rèn)可的遷移模型作為歐盟指令2001/61/EC合規(guī)性及質(zhì)量保證的一個(gè)新工具（EC, 2001) .2010年，位于伊斯普拉的歐盟委員會(huì)官方實(shí)驗(yàn)至－一聯(lián)合研究中心發(fā)布了一份技術(shù)報(bào)告，描述了塑科材料遷移數(shù)學(xué)模刑的檢人參數(shù)。假定案內(nèi)烯、聚乙稀、聚對(duì)苯二甲酸之一醇酯等聚合材科中有機(jī)物質(zhì)的遷移符合菲點(diǎn)第一擴(kuò)散定律，為獲得定量結(jié)果，必須知道聚合物中有機(jī)物的擴(kuò)散系數(shù)D.要估算擴(kuò)散系數(shù)D, 需要建立該系數(shù)與遷移物的相對(duì)分于質(zhì)量M、聚合物特異系數(shù) Ap 和聚合物特異“活化能”的關(guān)聯(lián)關(guān)系。

已經(jīng)確定的是，在大部分情況下，聚合材料中的物質(zhì)到接觸媒介中的質(zhì)量轉(zhuǎn)移（遷移）遵循菲克的擴(kuò)散定律（Franz和 Brandsch, 2013) .基于聚合材料擴(kuò)散特性的知識(shí)，我們能夠模擬它們?cè)趯?shí)際使用條件下的遷移行為，也就是在任何特定時(shí)間和溫度條件下，基于聚合物的任何厚度和面積體積比，通過計(jì)算來獲得特定物質(zhì)的遷移水平。對(duì)于高產(chǎn)量的聚合物，如聚烯烴、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚酰胺、聚苯乙烯和聚氯乙烯，目前已經(jīng)建立了一個(gè)實(shí)用的遷移模型，并經(jīng)過科學(xué)證實(shí)。該模型已被廣泛應(yīng)用于食品法規(guī)的合規(guī)性評(píng)估，以及作為向歐洲食品安全局或美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA) 等官方機(jī)構(gòu)申請(qǐng)新聚合物添加劑許可時(shí)提交的技術(shù)文件。

開放軟件工具

有一些公司／機(jī)構(gòu)提供遷移建模軟件，如：安全食品包裝門戶第三版¹，MIGRATEST軟件²和 AKTS- SML軟件³

【1 http: //modmol.agroparistech.fr/SFPP3/SFPP3download.html】

【2 http: //www.fabes-online.de/software.php?lang=en&mode=migratest 】

【3 http: //www.akts.com 】

食物消費(fèi)量評(píng)估

就塑料類FCM 而言，過去通常按照慣例假定：表面積與體積比為6d㎡的包裝材料用于包裝1kg 的食品。但是，在很多應(yīng)用中，實(shí)際包裝與食品重量的比例和這個(gè)值相差很大。例如，單獨(dú)包裝在紙盒或塑料中而不是批量散裝的食品以及裝在比薩盒的食品，面積與體積比通常高于6d㎡2/kg食品。而如咖啡機(jī)等的小部件，面積與體積比低于6d㎡/kg食品。此外，由于兒童的體重較輕，嬰兒食品有不同的要求。因此，在暴露評(píng)估時(shí)需仔細(xì)考慮6d㎡/kg食品的面積與體積比是否符合實(shí)際。

在調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具（FACET) 項(xiàng)目中，目前正在研發(fā)一種可用于優(yōu)化NIAS暴露水平的工具。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具是歐盟第7期研究與技術(shù)開發(fā)框架項(xiàng)目的成果，該項(xiàng)目于2008年至2012年間開展。涵蓋的食品接觸材料包括零售食品的包裝，其中有塑料（柔性和硬質(zhì)）、金屬容器、輕金屬包裝、紙和紙板及其所使用的黏合劑和油墨。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具可以在歐盟聯(lián)合研究中心網(wǎng)站¹上獲得，由調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具用戶組進(jìn)一步維護(hù)并開發(fā)（Oldring等，2014a, 2014b) .

【1 http: //ihcp.jrc.ec.europa.eu/our_activities/food-cons-prod/Chemicals_in_food/FACET 】

應(yīng)當(dāng)看到，調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具只是用于包裝材料暴露評(píng)估的工具，不能用于所有食品接觸材料總體暴露評(píng)估。例如，環(huán)狀聚酰胺寡聚物暴露可能和食品包裝中使用聚酰胺薄膜有關(guān)，也可能和普遍使用尼龍廚房用品有關(guān)。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具只適用于包裝部分。

調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具讓我們能夠更容易也更準(zhǔn)確地評(píng)估歐洲消費(fèi)者對(duì)包裝物質(zhì)的暴露情況，該工具包含8個(gè)歐盟國(guó)家通過15個(gè)不同年齡人群調(diào)查所獲得的實(shí)際食品消費(fèi)數(shù)據(jù)，每個(gè)調(diào)查通常覆蓋了一到兩千名消費(fèi)者。其數(shù)據(jù)庫(kù)里還有食品包裝組成成分（逐層描述）、包裝使用（哪種材料用于接觸哪種食品）以及生產(chǎn)這些包裝材料所使用物質(zhì)的詳細(xì)信息。每一項(xiàng)信息源中都包含代表歐盟市場(chǎng)的市場(chǎng)份額信息。用數(shù)學(xué)遷移模型將調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具中的這些數(shù)據(jù)結(jié)合起來，就得出了食品中物質(zhì)的濃度分布。對(duì)于輕金屬包裝上的涂層，其遷移可能非常徹底，此時(shí)遷移模型不那么有用，可使用遷移或提取數(shù)據(jù)（以為單位）作為直接輸入?yún)?shù)，繞開遷移模型。因此，為了估算包裝中遷移物的暴露情況，通過概率方法將濃度分布與全國(guó)食品消費(fèi)調(diào)查獲得的每種消費(fèi)食品數(shù)量相關(guān)聯(lián)。暴露估計(jì)值代表單個(gè)消費(fèi)者的水平，因此可以表示為全國(guó)膳食調(diào)查中覆蓋的不同人群和亞人群各種百分位數(shù)。

在考慮暴露時(shí)，必須考慮包裝忠誠(chéng)度。比如說，品牌忠誠(chéng)度指的是一位消費(fèi)者可能一直喝某個(gè)牌子的可樂，無論該可樂用什么包裝；與此不同的是，對(duì)包裝忠誠(chéng)的消費(fèi)者總是會(huì)喝聽裝或者瓶裝的可樂，無論該包裝是什么品牌。用戶使用調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具軟件時(shí)，可以選擇在考慮忠誠(chéng)度或不考慮忠誠(chéng)度的情形下運(yùn)行該程序。這會(huì)給出一系列暴露值?？梢詾槿魏问澄镱悇e的任何食品選擇忠誠(chéng)度。概括來說，在考慮忠誠(chéng)度的情況下進(jìn)行暴露評(píng)估，會(huì)使暴露分布范圍擴(kuò)大，出現(xiàn)最高的暴露情形，所以可以認(rèn)為這種考慮更保守。需要留意的是，對(duì)于某些在特定包裝類型中市場(chǎng)份額較高的食品來說，選不選擇忠誠(chéng)度，暴露評(píng)估的差別可能很小。

調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具中有用于生產(chǎn)FCM的物質(zhì)的龐大數(shù)據(jù)庫(kù)，但是沒有NIAS存在及其濃度的數(shù)據(jù)庫(kù)。對(duì)于和已存在物質(zhì)、包裝材料或一種或一組食品相關(guān)的NIAS, 可以使用調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具，通過以下三種方法之一估NIAS暴露情況。輕金屬包裝和其他FCM的輸入數(shù)據(jù)不同，因?yàn)榍罢呶词褂眠w移模型。

* 與某種已知物質(zhì)有關(guān)的 NIAS 

如果 NIAS是一種雜質(zhì)或是某種已知物質(zhì)的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，則屬于這種情形。使用者可以選擇一種已知物質(zhì)（如物質(zhì)A) , 將一種NIAS與之關(guān)聯(lián)。對(duì)于NIAS, 每當(dāng)材料中出現(xiàn)物質(zhì)A時(shí)，使用者輸入分子量、辛醇／水分配系數(shù)的對(duì)數(shù)（運(yùn)行遷移模型時(shí)需要）和物質(zhì)A中NIAS濃度的百分比；對(duì)于輕金屬包裝，使用遷移或提取數(shù)據(jù)，然后軟件會(huì)憑借龐大的數(shù)據(jù)庫(kù)，將NIAS與所有使用物質(zhì)A的情形關(guān)聯(lián)起來，從而估算出暴露量。

*與某種特定材料或加工有關(guān)的 NIAS

選擇曾經(jīng)出現(xiàn)或能夠發(fā)現(xiàn)NIAS的材料，可以將NIAS與某種或幾種材料相關(guān)聯(lián)。使用者需要輸入每種材料中NIAS的濃度（遷移模型預(yù)測(cè)值或者直接測(cè)量值）， 輸入的數(shù)據(jù)可以是點(diǎn)估計(jì)值或統(tǒng)計(jì)分布；同時(shí)輸入含有NIAS的每種材料的市場(chǎng)份額（百分比）。

* 與一種或多種不同種類食物有關(guān)的NIAS 

這種情形出現(xiàn)在諸如發(fā)現(xiàn)某種NIAS影響某種特定食物種類時(shí)。同時(shí)輸人每類食物中NIAS的濃度和出現(xiàn)概率的估算值－受影響的食物的份額。然后工具會(huì)使用這些濃度數(shù)據(jù)和食物消費(fèi)數(shù)據(jù)估算暴露情況。

與NIAS的安全評(píng)估相關(guān)的遷移水平

需要設(shè)定一個(gè)遷移水平，在此之上需要對(duì)NIAS 進(jìn)行安全評(píng)估，可以考慮兩種方案：

*遷移量在分析方法的檢測(cè)限之上；

*遷移量超過了安全暴露閾值對(duì)應(yīng)的水平，即所謂的基于暴露的方案。

方案一中，所規(guī)定的10ug/kg食品這一數(shù)值是歐洲通常的檢測(cè)限。該值和考慮健康的閾值沒有關(guān)聯(lián)，但是歐盟法規(guī)10/2011引人了這個(gè)值，作為所采用分析技術(shù)的典型檢測(cè)限（EU, 2011) .遷移量在這個(gè)檢出水平，預(yù)計(jì)不會(huì)引發(fā)暴露，所以這一閾值被視為對(duì)消費(fèi)者無風(fēng)險(xiǎn)的水平。歐盟法規(guī)10/2011的附件I和II中引用了這個(gè)檢測(cè)水平，用于確定IAS的功能阻隔層的符合性，只要所阻隔物質(zhì)沒有被歸為致癌／致突變／生殖毒性物質(zhì)，而且不是納米形式存在。

盡管10ug/kg的閾值被廣泛應(yīng)用于NIAS和其他不在列表中物質(zhì)的遷移評(píng)估，也用于沒有功能阻隔層的材料的遷移評(píng)估，但對(duì)于某些FCM來說，也存在挑戰(zhàn)，因?yàn)檫@些FCM可能釋放出很多超過這一限值的NIAS, 有時(shí)很難或者不可能識(shí)別。

方案二中，可以獲得與安全暴露閾值（基于物質(zhì)特定數(shù)據(jù)或計(jì)算機(jī)模擬工具）相對(duì)應(yīng)的遷移水平。該水平也被稱作“關(guān)注水平”， 可以按照Matrix 項(xiàng)目中介紹的方法得出¹。此時(shí)需要包裝食品的實(shí)際消費(fèi)量數(shù)據(jù)，以計(jì)算用于包裝每日消費(fèi)食品的包裝物的表面積。結(jié)合檢測(cè)到的從包裝的遷移量，可以按以下公式計(jì)算暴露量：

暴露量［ug/d] =遷移量［mg/d㎡] x表面積［dm2/d]

【1 http: //www.plast.dk/billeder/fakta/Plastics EuropeexposurematrixprojectOct2009.pdf 

http: //www.ilsi.org/Europe/Documents/117.pdf 】

Matrix數(shù)據(jù)庫(kù)由歐洲化學(xué)工業(yè)理事會(huì)食品接觸材料添加劑小組、歐洲塑料加工商協(xié)會(huì)、歐洲軟包裝協(xié)會(huì)和歐洲塑料制造商協(xié)會(huì)聯(lián)合發(fā)起并資助實(shí)施，目前尚未向公眾開放。Matrix項(xiàng)目獲得的國(guó)家數(shù)據(jù)包括德國(guó)、法國(guó)、意大利、西班牙和英國(guó)，它收集了這些國(guó)家消費(fèi)者食用的每種食品對(duì)應(yīng)的每種塑料材料的包裝表面積以及相應(yīng)的關(guān)注水平計(jì)算值。

和調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具一樣，Matrix也是用于包裝材料暴露的工具，不能用于所有FCM的總暴露評(píng)估。

在修訂以批準(zhǔn)許可為目的的FCM評(píng)估指南時(shí)，歐洲食品安全局也考慮了不同的暴露情況，討論了三個(gè)年齡組（嬰兒、兒童和成人）¹， 以及不同食物類別的情形。目前該指南尚未發(fā)布。

方案二在美國(guó)已使用多年。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)建立了包裝食品的消費(fèi)數(shù)據(jù)，用于滿足管理需求的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局在文件《行業(yè)指南：食品接觸物質(zhì)上市前提交材料建議－化學(xué)部分》 (Guidance for Industry: Preparation of Premarket Submissions for Food Contact Substances: Chemistry Recommendations) 中介紹了不同包裝材料的食品消費(fèi)數(shù)據(jù)（消費(fèi)系數(shù)和食品分配系數(shù)）， 這些數(shù)據(jù)也可以在互聯(lián)網(wǎng)上找到².該文件附錄IV的表格I和Ⅱ總體描述了用千估算每日攝入量的數(shù)據(jù)。此外，該指南文件還包括詳細(xì)的說明，指引企業(yè)如何計(jì)算消費(fèi)者對(duì)某種包裝材料遷移物的暴露水平。

 【1 Guidance of selected default values to be used by the EFSAScientific Committee, Scientific Panels and Units in the absence of actual measured date, EFSA Journal 2012; 10 (3) : 2579. 】

 【2 http: //www.fda.gov/food/guidanceregulation/guidancedocumentsr-Bulatoryinformation/ingredientsadditivesgraspackaging/ucm081818.htm 】

據(jù)作者所知，目前歐盟并無公開可用的表格來處理不同包裝材料的食物消費(fèi)數(shù)據(jù)，但是可以設(shè)想。在不久的將來，歐盟也會(huì)公布類似的表格。這些表格或許能夠作為指南，用以在估算每日攝人量的基礎(chǔ)上確定那些類型材料的關(guān)注水平。

 暴露評(píng)估的局限性

目前僅有少數(shù)幾個(gè)工具可以用于評(píng)估NIAS暴露，這些工具可以列出含有某種特定NIAS的材料的應(yīng)用和接觸的食品類型。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具有助于達(dá)到這個(gè)目的。但是，人體的NIAS暴露可能不僅僅來源于食品包裝，還可能來自于其他類型的FCM (如廚房器具）食品或其他來源。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具中除了食品包裝，并未包含其他暴露源。例如，水果上用于防止水分丟失所涂敷的蠟、可可豆帶來的礦物油等。此外，某種食品的消費(fèi)量和食品包裝類型在歐盟各個(gè)國(guó)家之間存在明顯差異。調(diào)味料、添加劑和食品接觸材料暴露評(píng)估工具中僅有八個(gè)歐盟成員國(guó)的食物消費(fèi)數(shù)據(jù)，因此，這也是導(dǎo)致恭露評(píng)估存在不確定性的原因之一。

 對(duì)于那些有多種來源且無法預(yù)測(cè)的未知NIAS,目前的暴露評(píng)估工具還不可能評(píng)估其暴露情況。即便是對(duì)很多可預(yù)測(cè)的已知 NIAS, 現(xiàn)有工具也缺之足夠信息進(jìn)行全面的暴露評(píng)估。但雙酚A是一個(gè)例外（EFSA, 2014) .

 NIAS 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

對(duì)5節(jié)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析，對(duì)某特定物質(zhì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，進(jìn)而得出 NIAS是否安全的結(jié)論。

 毒理學(xué)關(guān)注閾值

毒理學(xué)關(guān)注閾值是一個(gè)實(shí)用的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工具，所遵循的原則是：可以對(duì)所有化學(xué)物建立一個(gè)安全暴露閾值，低于該值則表明對(duì)人體健康有明顯風(fēng)險(xiǎn)的可能性非常低（Kroes等，2004) .如果某種物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)明確，那么可以根據(jù)化學(xué)物的一般人群暴露閾值（即“毒理學(xué)關(guān)注閾值”） 來評(píng)估其可能的健康風(fēng)險(xiǎn)。目前，基于廣泛公布的毒理學(xué)數(shù)據(jù)，已經(jīng)對(duì)具有類似化學(xué)結(jié)構(gòu)和潛在毒性的物質(zhì)建立了毒理學(xué)關(guān)注閾值。毒理學(xué)關(guān)注閾值方法并不意味著替代了塑料單體和添加劑等管控物質(zhì)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，針對(duì)這些物質(zhì)，法規(guī)要求必須遞交毒理學(xué)數(shù)據(jù)（EFSA,2012b) .

毒理學(xué)關(guān)注閾值¹ (關(guān)注水平，見5節(jié)）為：

【1譯者注：世界衛(wèi)生組織和歐洲食品安全局一致認(rèn)為，TTC閾值應(yīng)該基于公斤體重表示，即含有遺傳毒性警示結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，有抗膽堿酯酶活性的有機(jī)磷和氨苯甲酸酯類物質(zhì)，Cramer I類、且類和類結(jié)構(gòu)的閾值分別為0. 0025ug/ (kgbw·d) , 0. 3ug/ (kg bw·d) ,30hg/ (kgbw·d) , 9ug/ (kgbw·d) 和1. 5ug/ (kg bw·d) .】

*＜0. 15ug/d [或0. 0025ug/ (kg bw·d) ] : 含有遺傳毒性警示結(jié)構(gòu)的物質(zhì)；

*＜18g/d [或0. 3ug/ (kg bw·d) ] : 有抗膽堿酯酶活性的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類物質(zhì)；

*＜90ug/d [或1. 5ug/ (kg bw·d) ] : Cramer Ⅲ類和II 類物質(zhì)。

*＜1800ug/d [或30ug/ (kg bw.d) J: Cramer類物但有此物質(zhì)不適用于毒理字關(guān)注閾方法

（EFSA. 2012c; Koster, 2011) , 因?yàn)樗鼈冊(cè)谡?. 15ug/d 的情況下仍不安全［這類物質(zhì)屬于關(guān)注

群（CoC) : Kroes等，2004, 或者按照毒理學(xué)關(guān)注。值方法無法獲得足夠信息。因此，這些物質(zhì)需要昭上述程序方法進(jìn)行獨(dú)立危害評(píng)估（如，來自文獻(xiàn)的毒理學(xué)數(shù)據(jù)、交叉參照等）。下面列出了不適用于毒理學(xué)關(guān)注閾值，特別是與FCM有關(guān)的物質(zhì)類別：

*高潛能致癌物，即便是0. 15ug/d的暴露水平仍然太高

?N-亞硝胺和N-亞硝基化合物¹

橡膠材料中可能含有N-亞硝胺和N-亞硝基化合物，兩類物質(zhì)分別在歐盟理事會(huì)指令93/11/EEC中有所規(guī)定（EEC, 1993) .因?yàn)槿梭w內(nèi)能經(jīng)過亞硝化過程形成內(nèi)源性亞硝基化合物，所以對(duì)后者也有所限制，如果有跡象顯示后者會(huì)存在，應(yīng)當(dāng)和N-亞硝胺一同分析。

?黃曲霉毒素類化合物¹

?氧偶氮類化合物¹ 

[ 1 kroes等（2004) 確定的關(guān)注組群：三類高潛能致癌物（黃曲霉毒素類化和物，N-亞硝基化合物和氧偶氮類化合物）， 兩種非遺傳

毒性致癌物（類固醇、多鹵代二苯并－對(duì)－二吧英和多鹵代二本開呋喃）。]

?聯(lián)苯胺

塑料、紙和紙板的著色劑或者印刷油墨使用的某些顏料中含有的聯(lián)苯胺和其他芳香胺伯胺，可能均是 NIAS (雜質(zhì)、降解產(chǎn)物）。

?聯(lián)氨

氨基脲（一種聯(lián)氨衍生物）已被認(rèn)定是開旋瓶蓋中聚氯乙烯化合物所用發(fā)泡劑偶氮二甲酰胺降解過程中形成的一種NIAS.但是在近期的毒理學(xué)研究中，氨基脲未被認(rèn)定為“高潛能致癌物”

*已知或預(yù)期有生物蓄積效應(yīng)的物質(zhì)

?多鹵代二苯并－對(duì)－二喂英、多鹵代二苯并呋喃和二喂英類多氯聯(lián)苯¹

這些物質(zhì)在生物性產(chǎn)品中被發(fā)現(xiàn)，由環(huán)境蓄積造成。我們至少應(yīng)評(píng)估紙張、軟木和木材等材料是否含有這些物質(zhì)。由于顏料制作的最后步驟需要使用鹵化溶劑，二喂英也被視為印刷油墨的顏料雜質(zhì)。

?全氟辛酸

全氟辛酸作為含氟聚合物乳液聚合中的表面活化劑，用于廚房用具（如煎鍋等）的涂層，或紙和紙板的防油涂層。全氟辛酸在環(huán)境中持續(xù)存在，并可在血液、肝臟和腎臟中蓄積。

?礦物油

飽和烴礦物油（C16-C35) 作為污染物存在于回收紙和紙板中，會(huì)在人體組織中蓄積（仍在研究中）。

*金屬和有機(jī)金屬化合物

*類固醇¹

*納米材料

*放射性物質(zhì)

*蛋白質(zhì)

?致敏原

乳膠蛋白（如，手套、冷封膠）會(huì)引起接觸性過敏。

 【1  kroes等（2004) 確定的關(guān)注組群：三類高潛能致癌物（黃曲霉毒素類化和物，N-亞硝基化合物和氧偶氮類化合物）， 兩種非遺傳

毒性致癌物（類固醇、多鹵代二苯并－對(duì)－二惡英和多鹵代二苯并呋喃）?！?/span>

毒理學(xué)關(guān)注閾值方法在FCM來源的NIAS中的應(yīng)用

如果計(jì)算出的NIAS的暴露水平超過關(guān)注水平（如由某種特定物質(zhì)或結(jié)構(gòu)推斷出的毒理學(xué)關(guān)注閾值）， 則應(yīng)當(dāng)調(diào)整FCM 的生產(chǎn)過程或起始物，以消除FCM中的NIAS或?qū)IAS水平降至相關(guān)關(guān)注水平以下。

一般來說，F(xiàn)CM生產(chǎn)商希望盡可能多地了解他們的 FCM 或起始物中檢測(cè)出的水平高于關(guān)注水平 (見 5節(jié)）的物質(zhì)的特性（暴露與風(fēng)險(xiǎn)）。然后按照常規(guī)對(duì)某特定物質(zhì)進(jìn)行具體的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。不過在有些情況下，并不是所有超出遷移水平的遷移物都能被識(shí)別。涂層的遷移就是其中一個(gè)例子，涂層可能會(huì)形成數(shù)百個(gè)分子，而這些分子不能全部被識(shí)別（見前面的章節(jié)）。因此，用于NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法既取決于能否識(shí)別色譜圖中的所有峰，也取決于物質(zhì)的類型和遷移物的暴露量。NIAS風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法可以分為以下幾種：

a. 針對(duì)可預(yù)測(cè)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；

b. 針對(duì)已確認(rèn)但不可預(yù)測(cè)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；

c. 針對(duì)可檢出但無法確認(rèn)且不可預(yù)測(cè)的 NIAS 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

這些方法將在5. 5. 2節(jié)～5. 5. 4節(jié)中詳細(xì)說明。在所描述的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估策略中，體外生物測(cè)試結(jié)果可以用作輔助信息，見5節(jié)。

針對(duì)可預(yù)測(cè)的和已確認(rèn)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

通常，歐洲食品安全局或其他國(guó)家或歐盟當(dāng)局等會(huì)以科學(xué)意見的形式發(fā)布很多可預(yù)測(cè)的 NIAS的毒理學(xué)評(píng)估報(bào)告，并設(shè)立健康指導(dǎo)值，如每日可耐受攝人量。這些數(shù)據(jù)可用來設(shè)定關(guān)注水平。如果在國(guó)家或歐盟層面上沒有可用的毒理學(xué)評(píng)估信息，那么可以從文獻(xiàn)中獲取某物質(zhì)的特定毒理學(xué)數(shù)據(jù)，并在暴露邊距方法中應(yīng)用。關(guān)注水平取決于暴露邊距尺度，并可根據(jù)科學(xué)原則進(jìn)行評(píng)估（Schilter等，2014) .如果沒有可用的毒理學(xué)數(shù)據(jù)，或許可以結(jié)合毒理學(xué)關(guān)注閾值和計(jì)算毒理學(xué)，得出一個(gè)暴露邊距估算值。

當(dāng)預(yù)期產(chǎn)生的NIAS超過每日可耐受攝入量水平時(shí)，則應(yīng)當(dāng)調(diào)整 FCM的生產(chǎn)過程或起始物，以消除FCM中的NIAS或?qū)IAS水平降至相關(guān)每日可耐受攝入量以下。如果不能確定安全閾值或者暴露邊距被認(rèn)為不夠充分，那么應(yīng)當(dāng)調(diào)整FCM的生產(chǎn)過程或起始物以減少或消除FCM中的NIAS.如果不可能將NIAS降至其關(guān)注水平以下，那么需要遵循標(biāo)準(zhǔn)程序?qū)@種 NIAS 開展毒理學(xué)試驗(yàn)，見5節(jié)（EFSA, 2008) .

針對(duì)已確認(rèn)但不可預(yù)測(cè)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

對(duì)不可預(yù)測(cè)但已確認(rèn)的NIAS, 如果暴露量超過關(guān)注水平，則需要對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行特定風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。如果不能確證色譜圖上的所有峰，那么可以使用不同的分析技術(shù)進(jìn)行更多的嘗試來確認(rèn)這些物質(zhì)。特定風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的第一步與5. 5. 2中描述的“針對(duì)可預(yù)測(cè)的和已確認(rèn)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估”類似。

 針對(duì)可檢出但無法確認(rèn)且不可預(yù)測(cè)的NIAS 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

對(duì)于無法確認(rèn)且不可預(yù)測(cè)的NIAS, 如果通過調(diào)整FCM生產(chǎn)流程或起始物也無法消除或降低

到關(guān)注水平之下，則必須學(xué)試其他化學(xué)分析技術(shù)進(jìn)行鑒定。

如果使用多種分析技術(shù)仍無法幫助鑒定出NIAS結(jié)構(gòu)，則描述其部分特征可能有助于將這此無法確認(rèn)的 NIAS歸人特定的化學(xué)物類別（例如飽和支鏈烷烴等）。

如果對(duì) NIAS進(jìn)行部分鑒定也對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估過程沒有幫助，那么可以采用針對(duì)未知物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法（Rennen 等，2011; Koster等，2014) .這是一和逐步推進(jìn)的分析方法，可排除特定的化合物組別，其原理是遵循Kroes等建立的、并經(jīng) Munro等修訂的毒理學(xué)關(guān)注閾值決策樹（Kroes等，2004; Munro 等2008) .關(guān)注水平（Cramer III類的閾值）僅適用于符合以下情況的無法確認(rèn)的NIAS:

*沒有遺傳毒性；

*不是有機(jī)磷／氨基甲酸酯類化合物；

*不屬于任何一種已被毒理學(xué)關(guān)注閾值方法排除在外的類別（如非必需金屬元素）， 具體如下。

對(duì)于那些部分確認(rèn)的物質(zhì)，當(dāng)化學(xué)結(jié)構(gòu)及其預(yù)期的作用模式相似，那么可以考慮不同物質(zhì)的累積暴露。請(qǐng)注意，如果出現(xiàn)新的毒理學(xué)觀點(diǎn)和資料，將來Cramer III類物質(zhì)的毒理學(xué)關(guān)注閾值［1. 5mg（kg·d) , 或60kg成人每天90ug] 可能會(huì)被更改（更高或更低） (如，Leeman 等，2014; EFSA, 2015) .

如果NIAS水平超過關(guān)注水平，則要在FCM的生產(chǎn)過程中降低其水平，或者依照歐洲食品安全局在《指南備注》 (Note for Guidance) 中列出的毒性試驗(yàn)規(guī)程對(duì)這種NIAS進(jìn)行毒性評(píng)價(jià)，見《指南備汪》的附錄2 (EFSA, 2008) .

推導(dǎo)的關(guān)注水平取決于可能存在的遺傳毒性物質(zhì)、雖然已開展了一些工作來提高遺傳毒性試驗(yàn)的敏感性，但仍難以排除無法確認(rèn)且不可預(yù)測(cè)的 NIAS且有遺傳毒性的可能性，因?yàn)樵擃愇镔|(zhì)在遷移或提取物中的濃度可能很低。因此，5. 1節(jié)第1~5步中調(diào)查的樣本信息可以用來說明遺傳毒性物質(zhì)不太可能存在。應(yīng)用體外生物測(cè)試可能有助于對(duì)無法確認(rèn)且不可預(yù)測(cè)的 NIAS 進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估（見5節(jié)）。

 體外生物測(cè)試數(shù)據(jù)的解讀與管理

經(jīng)過選擇的體外生物測(cè)試旨在探明可在低劑量且可能無閾值情況下的作用機(jī)制／作用模式，如遺傳毒性。這些測(cè)試的目的是發(fā)現(xiàn)樣品在檢出水平時(shí)所產(chǎn)生的某種不良反應(yīng)。當(dāng)不可能完全鑒別某化學(xué)物時(shí)，這種測(cè)試尤為重要。但是，這種方法是針對(duì)危害評(píng)估的，并不能給消費(fèi)者提供是否面臨潛在健康風(fēng)險(xiǎn)的信息。

理論上，體外生物測(cè)試的結(jié)果可能會(huì)引發(fā)以下兩種情況：

*在遺傳毒性或細(xì)胞毒性和內(nèi)分泌活性的生物測(cè)試中均未觀察到任何活性；

*在一種或兩種體外生物測(cè)試中觀察到遺傳毒性、內(nèi)分泌活性或這兩種活性。

在第一種情況下，由于沒有觀察到與遺傳毒性或細(xì)胞毒性和內(nèi)分泌活性有關(guān)的危害，因此不需要關(guān)注。同時(shí)進(jìn)行的對(duì)檢測(cè)出的NIAS (包括已確認(rèn)和未確認(rèn)的）的定量估計(jì)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，將會(huì)得出最終結(jié)論。需要注意的是，迄今為止，針對(duì)遺傳毒性物質(zhì)的體外遺傳毒性生物測(cè)試還無法達(dá)到（亞）ppb水平，因此無法排除它們的存在。采取非靶向篩查技術(shù)來排除含有遺傳毒性警示結(jié)構(gòu)的分子時(shí)，也面臨同樣的情況。在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估或做出風(fēng)險(xiǎn)管理決策時(shí)，要考慮到這些局限性。

在第二種情況下，需要進(jìn)一步將生物活性與特定物質(zhì)聯(lián)系起來，可以采用不同的方法。

*確認(rèn)引起效應(yīng)的物質(zhì)或物質(zhì)類別，然后開展進(jìn)一步研究（如計(jì)算機(jī)模擬毒理學(xué)或體內(nèi)毒理學(xué)研究）對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。需要注意，在開展計(jì)算機(jī)模擬毒理學(xué)研究時(shí)，要了解物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

*用另一種合適的材料進(jìn)行驗(yàn)證，這種材料在體外生物測(cè)試中無活性且無其他缺陷。

*對(duì)可消除或降低體外生物測(cè)試活性的材料進(jìn)行測(cè)試的方法（可檢測(cè)的NIAS的模式分析可能會(huì)提供支持）。

 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的局限性

FCM的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估很大程度上取決于正確的暴露評(píng)估。這很可能是最關(guān)鍵的信息，因?yàn)镹IAS的暴露來源是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估程序中無法確定的步驟。不過，值得注意的是，這一不確定性并非僅針對(duì)FCM.大部分風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估都很難獲得準(zhǔn)確的暴露信息，因?yàn)槿狈碜哉麄€(gè)生產(chǎn)流程的數(shù)據(jù)，而且NIAS可能有不同的非FCM來源。

通常只對(duì)含量超過10ug/kg食品的 NIAS進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。這是監(jiān)管規(guī)定的檢測(cè)限，并不是根據(jù)分析或毒理學(xué)實(shí)際情況確定的。這對(duì)于NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估用處有限，一方面，很多 NIAS都超過這一閾值，這讓風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估困難重重，甚至完全不可能，另一方面無法確保更低濃度的 NIAS無需安全關(guān)注。更好和更實(shí)際的方式是轉(zhuǎn)向以暴露評(píng)估為導(dǎo)向的風(fēng)應(yīng)評(píng)估。

當(dāng)兩種或多種物質(zhì)的含量低于關(guān)注水平但可能有相同的靶器官、機(jī)制或作用模式時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生聯(lián)合毒性，但原則上NIAS篩查方法無法發(fā)現(xiàn)這種責(zé)性。根據(jù)兩篇文獻(xiàn)研究和Leeman等人發(fā)表的文獻(xiàn)，一般認(rèn)為，低劑量水平（如毒理學(xué)關(guān)注閾值）可能的累積效應(yīng)對(duì)健康的影響很小，因而幾乎不需要甚至完全不需要用校正系數(shù)來計(jì)算可能的累積效應(yīng)（EU-SCENIHR, 2012; Boobies等，2011; Leeman等，2013) .但是，對(duì)于內(nèi)分泌活性物質(zhì)和遺傳毒性物質(zhì)，不能排除低劑量下可能存在累積效應(yīng)（Leeman 等、2013) .可以通過針對(duì)這些終點(diǎn)的體外生物測(cè)試試驗(yàn)來檢測(cè)這兩種毒性。

NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)當(dāng)確定這些物質(zhì)不具有潛在的遺傳毒性。對(duì)于無法確認(rèn)的 NIAS, 不可能確定其中是否含有遺傳毒性警示結(jié)構(gòu)，可以使用其他方法進(jìn)行遺傳毒性體外生物測(cè)試。但是所用方法的靈敏度必須用與已知FCM相關(guān)的遺傳毒性物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證（如某些芳香族伯胺）， 并且與所評(píng)估的 FCM相關(guān)。目前正在研發(fā)一些很有應(yīng)用前景的體外生物測(cè)試方法，它們將為我們提供物質(zhì)作用機(jī)制／作用模式方面的信息（EFSA, 2011) .因此，建議按照目前可接受的最先進(jìn)的技術(shù)進(jìn)行遺傳毒性測(cè)試。

盡管此處列出了一些局限性，但本專著針對(duì)無法確認(rèn)的NIAS的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估策略是目前評(píng)估未知化學(xué)物的唯一可用方法。因此，在新的和（或）更靈敏的方法發(fā)布之前，這一方法應(yīng)當(dāng)被視為是最先進(jìn)的方法。無論如何，既然現(xiàn)在尚無其他方法可評(píng)估這些無法確認(rèn)的物質(zhì)，本專著所描述的策略和方法就是目前最好的。

附錄

NIAS的文獻(xiàn)綜述